Ikviens zina, ka ir daudz laboratoriju, tāpēc cik daudz cilvēku zina par PCR laboratorijām? Un kādas ir pamatprasības PCR laboratoriju projektēšanai? Pēc tam būs VOLAB Xiaobian, ko apspriest ar visiem ~
1, PCR laboratorijas izkārtojums
PCR amplifikācijas testa laboratorija principā ir sadalīta četrās atsevišķās darba zonās: reaģentu uzglabāšanas un sagatavošanas zona, paraugu sagatavošanas zona, amplifikācijas reakcijas maisījuma sagatavošanas un amplifikācijas zona un amplifikācijas produktu analīzes zona. Lai izvairītos no savstarpējas-piesārņošanas, katrā darba zonā ir stingri jāievēro viens virziens, tas ir, tikai no reaģentu uzglabāšanas un sagatavošanas zonas → parauga sagatavošanas zona → amplifikācijas reakcijas maisījuma sagatavošanas un amplifikācijas zona → amplifikācijas produkta analīzes zona. Reaģenta un parauga pārnešana starp katru eksperimentālo zonu jāveic, izmantojot pārneses logu.
2. Laboratorijas gaisa kondicionēšanas ventilācijas sistēmas projektēšana un spiediena kontrole
PCR laboratorijām nav stingru attīrīšanas prasību, taču, lai izvairītos no dažādu eksperimentālo apgabalu savstarpējas-piesārņošanas, ir ieteicams izmantot pilnas plūsmas gaisa sadales sistēmu. Tajā pašā laikā ir stingri jākontrolē nosūtīšanas un izsmelšanas proporcija, lai nodrošinātu katras eksperimentālās zonas spiediena prasības.
2.1, paraugu sagatavošanas zona
Galvenās darbības šajā jomā ir paraugu konservēšana, nukleīnskābju (RNS, DNS) ekstrakcija, uzglabāšana un pievienošana amplifikācijas reakcijas mēģenēm un DNS sintēzes noteikšana. Spiediena gradienta prasības šajā zonā ir: pozitīvs spiediens attiecībā pret blakus esošo zonu, lai izvairītos no aerosola piesārņojuma no blakus esošās zonas šajā zonā. Turklāt, tā kā iekraušanas darbības laikā var rasties aerosola izraisīts piesārņojums, ir jāizvairās no nevajadzīgas staigāšanas šajā zonā.
2.2. Reaģentu uzglabāšanas un sagatavošanas zona
Galvenās darbības šajā eksperimentālajā jomā ir uzglabāšanas reaģentu sagatavošana, reaģentu izdalīšana un galveno reakciju maisījumu sagatavošana. Reaģenti un materiāli, ko izmanto paraugu sagatavošanai, jānosūta tieši uz šo zonu, un tie nedrīkst iziet cauri citām zonām. Reaģentu izejvielas ir jāuzglabā šajā zonā un jāsagatavo nepieciešamajos uzglabāšanas reaģentos. Nav stingru prasību gaisa spiediena kontrolei.
2.3, pastiprināšanas produktu analīzes apgabals
Galvenā darbība šajā jomā ir pastiprināto fragmentu noteikšana. Šī zona ir galvenais pastiprinātā produkta piesārņojuma avots. Tāpēc spiediena gradienta prasības šai zonai ir šādas: Negatīvs spiediens attiecībā pret blakus esošo zonu, lai izvairītos no pastiprināto produktu difūzijas no apgabala uz citām zonām.
2.4, amplifikācijas reakcijas maisījuma sagatavošana un amplifikācijas zona
Galvenā darbība šajā jomā ir DNS amplifikācija. Turklāt šajā zonā var veikt arī sagatavotā DNS šablona (no parauga sagatavošanas zonas) un galvenā reakcijas maisījuma (no reaģentu uzglabāšanas un sagatavošanas zonas) pievienošanu, lai sagatavotu reakcijas maisījumu utt. Spiediena gradienta prasības šajā zonā ir šādas: negatīvs spiediens attiecībā pret blakus esošo zonu, lai izvairītos no aerosola noplūdes no zonas. Lai izvairītos no aerosolu radītā piesārņojuma, līdz minimumam jāsamazina nevajadzīga staigāšana teritorijā. Atsevišķas darbības, piemēram, paraugu ņemšana, jāveic tīrā stendā.
3.1. Stingra darba zonas sadale
(1) Katras eksperimentālās zonas iestatījums ir saprātīgs;
(2) Katrai eksperimentālajai zonai jābūt ar acīmredzamām atzīmēm (piemēram, uzkrītošiem māju numuriem vai dažādām zemes krāsām utt.), lai izvairītos no aprīkojuma elementu un reaģentu sajaukšanas dažādās eksperimentu zonās.
3.2, saprātīgi sistēmas iestatījumi
(1) Saprātīgs gaisa-kondicionēšanas ventilācijas sistēmas iestatījums, mēģiniet izmantot pilnu-send gaisa-kondicionēšanas sistēmu;
(2) Stingra gaisa plūsmas spiediena kontrole nodrošina dažādas spiediena prasības dažādās eksperimentu zonās.
3.3, standarta darbība
(1) Amplifikācijas pārbaudes laboratorijas tehniķiem ir jāveic -darba apmācība, un viņi var iesaistīties klīniskajos gēnu amplifikācijas testos tikai pēc apmācības nokārtošanas;
(2) Eksperimentālās darbības laikā operatoram jāvalkā cimdi un tie bieži jāmaina. Turklāt vienreizējās lietošanas vāciņu izmantošana darbības laikā ir arī efektīvs līdzeklis piesārņojuma novēršanai;
(3) Uzkopšanas darbi ir veikti savlaicīgi un pareizi. Pēc eksperimenta pabeigšanas vieta nekavējoties jānotīra. Papildus parastajiem dezinfekcijas šķidrumiem virsmu dezinfekcijai vai ultravioleto spuldžu apstarošanai un dezinfekcijai dažas eksperimentālās iekārtas būtu arī jāpakļauj augstspiediena sterilizācijai.
3.4, stingra vadība
(1) Stingri kontrolēt personālu, kas ienāk laboratorijā un atstāj to. Personas, kas nav saistītas ar eksperimentu, nedrīkst ieiet un atstāt laboratoriju pēc vēlēšanās, un, ja nepieciešams, tās ierīko neatkarīgas ejas un durvis uz visu eksperimenta laukumu un no tās.
(2) Samaziniet nevajadzīgu staigāšanu eksperimentālajā zonā, lai samazinātu savstarpējas piesārņošanas iespēju.
(3) Pastiprinātā produkta analīzes zona ir vissvarīgākais pastiprinātā produkta piesārņojuma avots. Atkritumu šķīdumu nevar izmest laboratorijā. Tas ir jāiemērc dezinfekcijas šķīdumā un pēc tam jāizmet vietā, kas atrodas prom no laboratorijas. Izmantotie uzgaļi ir vienreizlietojami. Materiāli arī jādezinficē un jāsterilizē un pēc tam vienmērīgi jāapstrādā, piemēram, jāsadedzina;
(4) Pastiprināšanas produktu analīzes zonā var izmantot noteiktas gēnu mutācijas un toksiskas vielas, un īpaša uzmanība jāpievērš eksperimentētāja drošības aizsardzībai.
3.5. Pilnīgas laboratorijas iekārtas
Pilnvērtīgas laboratorijas palīgtelpas ir nepieciešamie nosacījumi eksperimentālā darba nodrošināšanai. Atbilstošajam aprīkojumam un instrumentiem jābūt aprīkotiem atbilstoši katras laboratorijas dažādajam eksperimentālajam saturam, piemēram, īpaši-tīriem stendiem, centrifūgām un paraugu padevējiem.